親和柱原理介紹

親和層析（IAC）可稱為色譜技術，是一種利用抗原特異性可逆結(jié)合特性的SPE技術,根據(jù)抗原的高選擇性,從復雜的待測樣品中提取目標化合物。主要原理是將抗、惰性微珠共價結(jié)合，然后裝入小柱，將被測溶液流過親和柱，而非目標化合物則沿柱流下，然后用洗脫緩沖液洗脫抗原（被測物），從而得到純化的抗原（被測物），收集的抗原樣品液可直接用于 HPLC 分析或處理后用熒光光度計檢測。

真菌復合親和柱

復合柱規(guī)格：除IAC208/IAC214為6ml外，其余都為3ml，

IAC201AZ-玉米赤霉烯酮2合1親和柱 

IAC202AO-赭曲霉A 2合1親和柱 

IAC203AOZ-赭曲霉A-玉米赤霉烯酮3合1親和柱 

IAC204ADOZ-嘔吐-赭曲霉A-玉米赤霉烯酮 4合1親和柱 

IAC205DZ嘔吐-玉米赤霉烯酮  2合1親和柱 

IAC206OZ赭曲霉A-玉米赤霉烯酮2合1親和柱 

IAC207ADZ-嘔吐-玉米赤霉烯酮3合1親和柱 

IAC208ADOFTZ-嘔吐-赭曲霉A-伏馬-T2-玉米赤霉烯酮6合1親和柱

IAC209 DTZ 嘔吐-T2-玉米赤霉烯酮3合1

IAC210 ADOFZ-嘔吐-赭曲霉A-伏馬-玉米赤霉烯酮5合1親和柱

IAC211 ADOFTZ-嘔吐-赭曲霉A-伏馬-T2-玉米赤霉烯酮-雜色曲霉7合1親和柱

IAC212 FZ伏馬-玉米赤霉烯酮2合1親和柱

IAC213 ADFZ-嘔吐-伏馬玉米赤霉烯酮4合1親和柱

親和柱——親和層析的分離原理

生物體中許多大分子化合物具有與其結(jié)構(gòu)相對應的專一分子可逆結(jié)合的特性，如抗原與抗體，酶與底物或抑制，與受體等，這種結(jié)合往往是專一的而且是可逆的，生物分子間的這種結(jié)合力稱為親和力，親和層析的分離原理簡單地說就是通過將具有親和力的兩個分子中的一個固定在不溶性的基質(zhì)（也稱載體）上，利用分子間親和力的特異性和可逆性，對另一個分子進行分離純化。被固定在基質(zhì)上的分子稱為配體，配體與基質(zhì)共價結(jié)合，構(gòu)成親和層析的固定相，稱為親和吸附劑，蛋白質(zhì)的生物特異性可以幫助選擇特異性的配體，一般是目的蛋白質(zhì)與配體結(jié)合而不吸附雜質(zhì)。蛋白質(zhì)吸附后再利用洗脫液的快速變換和加入競爭劑的方法進行洗脫。

親和柱——親和層析的原理

通常，在開始親和層析前需要預先進行全細胞提取物的粗制，例如細胞裂解液，生長培養(yǎng)基。

首先將固定相裝入帶有流動相的色譜柱中，其中含有某類特定的生物大分子（從DNA到蛋白質(zhì)，取決于實驗需求）。等待一段時間使兩相充分混合，隨后將洗滌緩沖液倒入色譜柱中。洗滌緩沖液通過破壞非目標生物分子與固定相的較弱結(jié)合來去除非目標生物分子。目標生物分子對固定相具有較高的親和力，因此能夠保持與固定相的結(jié)合，而不會被洗滌緩沖液沖走。然后將洗脫緩沖液倒入含有剩余目標生物分子的色譜柱中。洗脫緩沖液比洗滌緩沖液，能夠從更大程度上減弱靶生物分子與固定相之間的相互作用，從而洗脫靶生物分子。洗脫得到的溶液包含洗脫緩沖液和目標分子，稱為洗脫液。

固定相一般是凝膠基質(zhì)，常見的有瓊脂糖。為了防止目標分子與配體結(jié)合過程中的空間干擾或重疊，首先將含有烴鏈的抑制連接到瓊脂糖珠（固體支持物）上。這種具有烴鏈的抑制通常被稱為瓊脂糖珠和靶分子之間的間隔基。