制備色譜能當(dāng)分析色譜用嗎？

目前，很多客戶的要求都傾向于買一臺(tái)液相能同時(shí)解決制備和分析的所有問(wèn)題，那就相當(dāng)OK。這樣的客戶大多是科研經(jīng)費(fèi)緊張，好不容易批下來(lái)點(diǎn)錢，不想都花在后期純化和分析上，所以盡量二合一。

在我看來(lái)，分析液相和制備液相是通用的，只是精度的差別問(wèn)題。比如，分析的液相一般流速在0.1～10mL/min，活塞的一個(gè)沖程大概是10μL，而普通的制備液相一般都是10～100mL的流速，因此活塞桿的尺寸也會(huì)變大，一個(gè)沖程差不多是100μL；流速的精度相對(duì)來(lái)說(shuō)就差了很多。流速大了，管路也相應(yīng)的粗了不少，以降低高流速帶來(lái)的背景壓力；但這樣的儀器用于分析的話，柱后的擴(kuò)散現(xiàn)象相當(dāng)?shù)膮柡?，即使在色譜柱上達(dá)到基線分離的兩個(gè)峰，由于柱后擴(kuò)散的作用，到達(dá)檢測(cè)器的時(shí)候，差不多又會(huì)合到一起了；另外就是檢測(cè)器的差異，主要是檢測(cè)池的大小和狹縫的大小不同帶來(lái)的靈敏度的不同。制備儀器一般靈敏度是分析的1/20，以保證大量進(jìn)樣后，不會(huì)超過(guò)量程太多而平頭，分不清到底分沒(méi)分開(kāi)了。

倒是有個(gè)折中的辦法，就是買分析型的液相，然后接個(gè)半制備的色譜柱。半制備就是直徑一厘米的柱子，流速5mL以內(nèi)，因此這個(gè)分析液相能達(dá)到；進(jìn)樣量大約是分析柱的10～20倍，檢測(cè)器可能會(huì)平頭，沒(méi)關(guān)系，換個(gè)波長(zhǎng)，找個(gè)吸收較弱的波長(zhǎng)當(dāng)檢測(cè)波長(zhǎng)就OK了，不是大量制備的話，我想基本可以滿足需要了。

工業(yè)制備色譜

工業(yè)色譜又稱制備色譜。利少{J組分的差速遷移而實(shí)現(xiàn)I.業(yè)規(guī)?；旌衔锓蛛x的方法它包括一個(gè)流動(dòng)相(被分離的氣相或液相)和一個(gè)固定相。兩相在色譜柱r}，進(jìn)行接觸，在色譜柱‘l，流動(dòng)相沿固定相流動(dòng)，由」幾混合物中各組分被固定相滯流程度不同，它們隨流動(dòng)相移動(dòng)的速度就不同，因而可使各組分.4.相分離。根據(jù)流動(dòng)相的不}.可，可分為}L相色譜與液相色譜兩類。根據(jù)固定相的類型，可分為吸附色譜、分配色iH離子交換色譜、親和色潛‘排I}}L色譜五類。上業(yè)色譜可分離選擇性系數(shù)非常接近的組分，它適用于熱敏N}物質(zhì)的分離，對(duì)制備高純物質(zhì)特別有效

蛋白質(zhì)是具有一定構(gòu)象(空間結(jié)構(gòu))的生物大分子:其一級(jí)結(jié)構(gòu)是形成肽鏈的氨基酸序列(數(shù)目、種類、順序)，是蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ);在一級(jí)結(jié)構(gòu)水平上，部分肽鏈發(fā)生卷曲和折疊，形成其二級(jí)結(jié)構(gòu)，這種卷曲和折疊是靠肽鏈中的羰基與氨基之間的氫鍵維持的:在二級(jí)結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上，多肽鏈再盤繞和折疊，形成三維空間形態(tài)，即為蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu):而蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)是指同一蛋白質(zhì)中各條肽鏈之間的相互關(guān)系。

蛋白質(zhì)的特點(diǎn)使得其分離過(guò)程與傳統(tǒng)化工分離過(guò)程有著極為不同的特點(diǎn):(1)分離對(duì)象是具有特定的生物活性的生物大分子產(chǎn)品，分離過(guò)程設(shè)計(jì)中不恰當(dāng)?shù)奈锢砗突瘜W(xué)環(huán)境等(如溫度、PH值、緩沖液選擇、、攪拌和剪切力等)皆有可能引起其蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，從而使之失活;(2)由于發(fā)酵液、細(xì)胞培養(yǎng)液或勻漿液中，我們所需要的目標(biāo)產(chǎn)物往往存在于含有許多性質(zhì)十分相似的雜質(zhì)的稀溶液中，如何從這樣一種復(fù)雜的稀溶液中經(jīng)濟(jì)有效地提取產(chǎn)物是生物分離技術(shù)面臨的重大課題;(3)從衛(wèi)生和安全角度出發(fā)，對(duì)于用基因工程產(chǎn)品，有著極高的純度和同一性要求，對(duì)其中的有害雜質(zhì)去除率要求極高，對(duì)分離設(shè)備材質(zhì)和分離過(guò)程中引入的分離介質(zhì)也有著嚴(yán)格的限制。