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制備液相知多少
色譜分析的目的
分析色譜的目的,是分析出混合物中一個(gè)(或者幾個(gè))純物質(zhì)的含量;制備色譜的目的,是從混合物中得到純物質(zhì)。為了加快分離的時(shí)間與提高分離的效率,制備色譜的的進(jìn)樣品量很大,導(dǎo)致制備色譜柱子的分離負(fù)荷的相應(yīng)加大,也就必須加大色譜柱填料,增大制備色譜的直徑和長度,使用的相對(duì)多的流動(dòng)相。然而,當(dāng)色譜柱上樣品負(fù)載加大的時(shí)候,往往導(dǎo)致柱效急劇下降而得不到純的產(chǎn)品。制備色譜,要解決容量與柱子效果之間的矛盾,對(duì)重現(xiàn)性也要考慮。從經(jīng)濟(jì)上來說。制備色譜要爭取少用填料,少用溶劑,要盡可能多的得到產(chǎn)品。
液相色譜的發(fā)展變化介紹
液相色譜色譜法按分離機(jī)制的不同分為液固吸附色譜法、液液分配色譜法(正相與反相)、離子交換色譜法、離子對(duì)色譜法及分子排阻色譜法。 液相色譜的發(fā)展,涉及鍵合相,基于被測物質(zhì)在固定相(含液體)和流動(dòng)相之間的相對(duì)溶解度的差異,通過溶質(zhì)在兩相之間進(jìn)行分配以實(shí)現(xiàn)分離。將固定液機(jī)械地涂漬在擔(dān)體上組成固定相?;瘜W(xué)鍵合固定相。這種固定相是通過化學(xué)反應(yīng)把各種不同的有機(jī)基團(tuán)鍵合到硅膠(載體)表面的游離羥基上,代替機(jī)械涂漬的液體固定相。這不僅避免了液體固定相流失的困擾,還大大改善了固定相的功能,提高了分離的選擇性,化學(xué)鍵合色譜適用于分離幾乎所有類型的化合物。
色譜柱的技術(shù)都有哪些?比如,封尾等,這些技術(shù)在應(yīng)用時(shí)都體現(xiàn)在哪里?
色譜柱技術(shù)包括填料技術(shù),封尾技術(shù)和裝柱技術(shù)等,填料技術(shù)自不待言,填料的差異對(duì)色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響,色譜填料的鍵合相密度的不同也會(huì)影響到填料表面硅羥基外露的多少,進(jìn)而影響填料的選擇性。封尾技術(shù)中用到的封尾試劑的差異也會(huì)對(duì)色譜柱的性質(zhì)產(chǎn)生很大的影響,如體現(xiàn)在色譜填料的pH耐受范圍,水相耐受范圍,極性強(qiáng)弱等。裝柱技術(shù)也沒有想象中的這么簡單,不同固定相、不同粒徑、不同柱管內(nèi)徑和長度,裝柱工藝都有所不同,要裝出緊密、穩(wěn)定、均一的柱床,更多是一門藝術(shù),需要經(jīng)驗(yàn)積累。