同一種填料的分析柱、制備柱按線(xiàn)形放大公式套，分離度會(huì)不會(huì)變化？

一般會(huì)有一定的變化，原因有以下幾點(diǎn)：

（1）制備柱的裝填是否均勻，如不均勻則可能產(chǎn)生渦流擴(kuò)散使各個(gè)組分的經(jīng)過(guò)通道的直徑不同、阻力不一樣，停留時(shí)間不同，色譜峰可能變寬。

（2）如果樣品在流動(dòng)相中溶解度小，在制備色譜上會(huì)有不同的峰展寬。

（3）如果樣品在分析柱上有展寬或拖尾的現(xiàn)象，放大到制備柱上后峰的展寬和拖尾經(jīng)常會(huì)非常嚴(yán)重，導(dǎo)致分離失敗。

制備色譜柱如何測(cè)柱效？

可以選擇幾種物質(zhì)，苯，萘、蒽等的衍生物上柱，流動(dòng)相一般用65-80%的甲醇/水，測(cè)定后根據(jù)保留時(shí)間計(jì)算塔板數(shù)。由于制備色譜的管路死體積一般比較大，很難得到和供應(yīng)商相同的柱效。建議在制備柱開(kāi)始使用時(shí)在自己的色譜上測(cè)一下柱效，然后定期檢測(cè)柱效進(jìn)行以進(jìn)行比較。

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工業(yè)制備色譜

工業(yè)制備色譜系統(tǒng).電氣柜設(shè)置在機(jī)架內(nèi)部左上端,過(guò)墻兩通連接二號(hào)兩通球閥,二號(hào)兩通球閥通過(guò)單向閥連連接流量調(diào)節(jié)閥,一號(hào)質(zhì)量流量計(jì)一端連接流量調(diào)節(jié)閥,質(zhì)量流量計(jì)另一端通過(guò)混合器連接至三號(hào)三通球閥與數(shù)個(gè)進(jìn)樣泵,進(jìn)樣泵通過(guò)二號(hào)三通球閥連接壓力變送器,一號(hào)三通球閥通過(guò)管道分別連接至在線(xiàn)過(guò)濾器與二號(hào)質(zhì)量流量計(jì),二號(hào)質(zhì)量流量計(jì)則通過(guò)壓力變送器與一號(hào)兩通球閥連接至流量計(jì)顯示器,電機(jī)連接進(jìn)樣泵;采用上述技術(shù)方案后,本實(shí)用新型有益效果為:其分離效率和生產(chǎn)能力大大高于傳統(tǒng)的柱層析設(shè)備,并可實(shí)現(xiàn)在線(xiàn)監(jiān)測(cè),保證產(chǎn)品的質(zhì)量.

用于制備和生產(chǎn)的大規(guī)模生物分離技術(shù)所面臨的問(wèn)題是:如何在不破壞目標(biāo)蛋白質(zhì)的生物活性的前提下(溫和的條件)，以很高的識(shí)別性，以及較高的分離能力和收率，經(jīng)濟(jì)有效地從稀溶液中提取、分離、純化目標(biāo)產(chǎn)物。吸附通常可以在常溫、水相、適當(dāng)?shù)膒H、離子強(qiáng)度、避免使用等有害的化學(xué)試劑等溫和的條件下操作，液相色譜具有很高的分離性能，適合于生物分離過(guò)程的要求。