組織研磨機(jī)的工作原理

組織研磨機(jī)是一款名副其實的實驗室多功能樣品制備儀器，是專門為“少量樣品”而推出的新產(chǎn)品。5)將研磨轉(zhuǎn)速調(diào)到1800，設(shè)定研磨時間為90秒（可根椐樣品的研磨的難易程度來調(diào)節(jié)，此數(shù)據(jù)是以銀杏為樣本得出）。高通量組織研磨機(jī)可在1-3分鐘內(nèi)對硬性、軟性、彈性等樣品進(jìn)行快速有效的干磨或濕磨，亦可達(dá)到對粉體及混濁液混合、均相化的目的，還可以進(jìn)行低溫液氮冷凍研磨，也可以進(jìn)行生物細(xì)胞破碎和DNA/RNA提取。高通量組織研磨機(jī)可研磨的樣品種類包括：植物組織、動物組織、細(xì)胞、細(xì)菌、芽孢和酵母等。

組織研磨機(jī)的詳細(xì)介紹

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      組織研磨機(jī)具有對稱的一對高速大振幅的搖臂，研磨罐在水平方向上進(jìn)行高頻鐘擺式振動，研磨球在慣性的帶動下以高能量反復(fù)撞擊及摩擦，從而達(dá)到粉碎研磨的效果。

研磨罐的運(yùn)動是與罐內(nèi)研磨球的運(yùn)動進(jìn)行疊加，將樣品充分混合?；旌闲Ч梢酝ㄟ^使用多個不同直徑的小研磨球來得到進(jìn)一步的提高，高通量組織研磨機(jī)研磨時使用多個不同直徑的小研磨球可以大大提高樣品的均混度。組織研磨機(jī)的詳細(xì)介紹以下內(nèi)容是由北京旭鑫盛科有限公司提供，希望對同行業(yè)有所幫助。生物細(xì)胞就可以通過使用大量小球(如瑪瑙球)進(jìn)行細(xì)胞破壁。球與球之間的巨大撞擊和摩擦可有效地實現(xiàn)細(xì)胞的破壁。

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      組織研磨儀是一種特殊的、快速的、率的、多試管的研磨系統(tǒng)。組織研磨儀是一臺典型的種子檢驗儀器，或者說協(xié)助種子檢驗的儀器，是用于輔助種子檢驗的，主要作用是將種子粉碎。它能將任何來源(包括土壤、植物和動物的組織、細(xì)菌、酵母、真菌、孢子、古生物標(biāo)本等)的原始DNA、RNA和蛋白質(zhì)進(jìn)行提取和純化。 與目前已有的其它樣品制備方法相比，具有通用性廣、靈活的優(yōu)點(diǎn)，可以、快速、穩(wěn)定地裂解并純化各種類型樣品的核酸與蛋白。

組織研磨儀對動物組織的研磨

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每50～100mg 組織加入0.2體積 TRIzol

1.加鋼球1顆,設(shè)置研磨儀參數(shù)：12單位振頻,1min,每種樣品基本充分勻漿

2. 將上述勻漿液每0.2體積 TRIzol 試劑用量的勻漿液中加入0.04體積氯方，蓋緊管蓋，手動劇烈震搖15 秒鐘，然后室溫靜置2～3 分鐘。

3. 4℃ 10,000g 離心10 分鐘。

4. 小心吸取上層水相（無色）加入到新試管中，同時計算所吸取的水相體積。不必過多吸取，防止吸入DNA和蛋白雜質(zhì)（中間層，白色）。

5. 加入所吸取水相等體積預(yù)冷的異丙淳，蓋緊管蓋，輕輕搖勻。

6. 室溫靜置10 分鐘，待RNA 充分沉淀（為減少RNA 降解，此步驟可省略）。

7. 4℃ 10,000g 離心10 分鐘。

8. 將上清棄除（注意別丟棄沉淀），每管加入0.2體積75%乙醇潤洗，蓋緊管蓋，輕輕晃動試管，以去除殘留的異丙淳和鹽份。4℃ 7,500g 離心5 分鐘。

9. 將上清棄除（注意別丟棄沉淀），打開管蓋，將RNA 沉淀干燥（室溫?fù)]發(fā)或真空干燥）。注意RNA 沉淀不可完全干燥，否則難以溶解。

10. 將RNA 沉淀溶解于適量的無RNase 水中。如果RNA 沉淀溶解不完全，將使OD260/OD280≤1.6。此RNA 溶液可用于進(jìn)一步實驗，或者-70℃保存。