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細(xì)胞在旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)注意事項(xiàng)!
1) 如果細(xì)胞未在轉(zhuǎn)瓶中培養(yǎng),只需搖晃、刮取或胰蛋白酶處埋(見下文“胰蛋白酶處理分離細(xì)胞”)即可將細(xì)胞從細(xì)胞瓶表面分離下來。
2) 輕輕地吹打細(xì)胞(移液管上下吹打),將細(xì)胞團(tuán)吹散。
3) 取1ml 細(xì)胞懸液進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),勿讓細(xì)胞沉積在瓶底。輕輕來回轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞處于懸浮狀態(tài)。
4) 稀釋細(xì)胞,使其終濃度約為每毫升 2x105~4x105。
5) 進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),并用臺(tái)盼藍(lán)排斥試驗(yàn)進(jìn)行細(xì)胞活力檢測(cè),操作方案見下文“細(xì)胞計(jì)數(shù)”。
歐洲進(jìn)口4位MCS-104XL生物反應(yīng)專用磁力攪拌器
歐洲進(jìn)口4位MCS-104XL生物反應(yīng)專用磁力攪拌器
細(xì)胞大量培養(yǎng)擴(kuò)增的一些方法研究?
小的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,瓶底面積很小,只能培養(yǎng)很少細(xì)胞,要不斷分瓶,得用許多長(zhǎng)的瓶子不斷滾動(dòng)來獲得較多的細(xì)胞。后來,人們又采取高密度培養(yǎng)方法,以求在一定的容積內(nèi)能培養(yǎng)更多的細(xì)胞。對(duì)于要求附著生長(zhǎng)的細(xì)胞,為提高表面積/體積的比值,用空心纖維和微載體作為附著物,可以大大提高培養(yǎng)容積的利用率。深度超過5mm,需要攪動(dòng)培養(yǎng)基,超過10cm,還需要深層通入CO2和空氣,以保證足夠的氣體交換。微珠作為載體,是提高培養(yǎng)密度的有效方法,細(xì)胞可以生長(zhǎng)在微珠的表面,微載體法,可使在同樣容積內(nèi)培養(yǎng)細(xì)胞數(shù)增加幾個(gè)量級(jí)。隨著細(xì)胞的生長(zhǎng),附近的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)逐漸減少,廢物逐漸增多,為了使生長(zhǎng)的細(xì)胞不斷接觸到營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),并離開廢物,微珠能在培養(yǎng)介質(zhì)中分散和懸浮,并且不斷供應(yīng)培養(yǎng)液,不斷排出廢液。
TECHNE生物反應(yīng)專用磁力攪拌器與常規(guī)的攪拌器的區(qū)別?
TECHNE生物反應(yīng)專用磁力攪拌器與常規(guī)的攪拌器的區(qū)別?
一種低成本的懸浮培養(yǎng)技術(shù)的X大優(yōu)勢(shì)在于(帶耳的旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶加細(xì)胞培養(yǎng)用低速磁力攪拌器):
生物反應(yīng)專用磁力攪拌器需要配合生物反應(yīng)專用的旋轉(zhuǎn)瓶及葉片使用,它與常規(guī)的磁力攪拌器主要體現(xiàn)在以下幾方面的不同:
1 TECHNE生物專用攪拌器轉(zhuǎn)速底,X高轉(zhuǎn)速100轉(zhuǎn)左右;
2 TECHNE生物專用磁力攪拌器轉(zhuǎn)速控制精X確,示值誤差小于3轉(zhuǎn);
3 TECHNE生物專用磁力攪拌器具有緩加速和緩減速功能,能夠在加速和減速過程中保護(hù)被培養(yǎng)的細(xì)胞而不破壞細(xì)胞;
細(xì)胞培養(yǎng)瓶和細(xì)胞培養(yǎng)轉(zhuǎn)瓶的區(qū)別再哪里?
細(xì)胞培養(yǎng)瓶和細(xì)胞培養(yǎng)轉(zhuǎn)瓶的區(qū)別再哪里?
細(xì)胞培養(yǎng)轉(zhuǎn)瓶與細(xì)胞培養(yǎng)瓶主要的區(qū)別是有一個(gè)轉(zhuǎn)動(dòng)裝置可以將培養(yǎng)瓶放其上,使瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)的細(xì)胞 能夠更充分的與空氣接觸 利于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收、利于細(xì)胞培養(yǎng)。配套的生物反應(yīng)器攪拌器為一種低速磁力攪拌器,該攪拌器的特點(diǎn)是速度控制準(zhǔn)確,軟件顯示速度與實(shí)際速度小于等于3轉(zhuǎn),同時(shí),具有緩慢加速與緩慢減速功能,有利于細(xì)胞的生長(zhǎng)。通常這種培養(yǎng),需要培養(yǎng)使用精度可靠的攪拌器,比如TECHNE轉(zhuǎn)瓶配套的生物磁力攪拌器配合使用,培養(yǎng)過程中,對(duì)于貼壁細(xì)胞,可結(jié)合微載體使用!