PCR實驗室凈化中光催化與臭氧凈化技術(shù)

它的殺菌作用還容易受到許多因素的影響，例如空氣中的微生物類型，環(huán)境溫度，空氣的相對濕度以及紫外線強度，這其中某個因素的不合就可能導(dǎo)致消菌的失敗，達(dá)不到預(yù)期效果。PCR實驗室凈化中，紫外線對多數(shù)微生物具有殺滅作用的同時，可能會人體黏膜和皮膚，在房間整體消毒時人員需要離開。臭氧是一種的消毒劑。臭氧又稱三氧，分子式為O3，是一種具有特殊臭味淡藍(lán)色強氧化性氣體。濃度低時有“清新“氣味，濃度高時有強烈的漂氣味。它的氧化還原電位很高，僅次于氟，其氧化能力在氯和二氧化氯之上，PCR實驗室凈化中，由于具有極強的消菌能力和去除異味的作用，目前已得到了廣泛應(yīng)用。目前制備臭氧的方法有很多種，比較常見的有：電暈放電法、電化學(xué)法、光化學(xué)等。

為避免提取的核酸在柜內(nèi)反復(fù)循環(huán)，造成標(biāo)本之間的交叉污染，出現(xiàn)假陽性結(jié)果，該區(qū)域配備的生物安全柜必須是B2型的。生物安全柜工作區(qū)垂直氣流全部來自實驗室，排風(fēng)經(jīng)過過濾器(www.rfilter.com)過濾后直接排至室外，不允許回到安全柜和實驗室中。

根據(jù)經(jīng)驗，如果實驗室內(nèi)配備生物安全柜，每配備一臺，實驗室的面積增加10m2;標(biāo)本制備區(qū)的面積宜在25m2~30m2之間。本區(qū)的壓力梯度要求為:相對于鄰近區(qū)域為正壓，以避免從鄰近區(qū)進入本區(qū)的氣溶膠污染。

擴增室該區(qū)域主要進行的操作為DNA或cDNA擴增。此外，已制備的DNA模板和合成的cDNA(來自樣本制備區(qū))的加入和主反應(yīng)混合液(來自試劑貯存和制備區(qū))制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進行。

在巢式PCR測定中，通常在輪擴增后必須打開反應(yīng)管，因此巢式擴增有較高的污染危險性，第二次加樣必須在本區(qū)內(nèi)進行。

擴增室主要配備PCR實驗室的核心儀器PCR儀，本文實例中使用了ABI7500和ABI9700兩種PCR儀。

在實驗室建造過程中，需要給PCR儀配備專門的UPS電源，以保證其正常工作。該區(qū)面積控制在15m2~20m2。

本區(qū)的壓力梯度要求為:相對于鄰近區(qū)域為負(fù)壓，以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。為避免氣溶膠所致的污染，應(yīng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)的不必要的走動。個別操作如加樣等應(yīng)在超凈臺內(nèi)進行。建議采用5~10Pa壓差，在控制上比較容易實現(xiàn)。

達(dá)到PCR實驗室凈化要求所應(yīng)采取的四大措施

通過PCR實驗室凈化原理分析，為達(dá)到設(shè)定的凈化標(biāo)準(zhǔn)要求，今天康德萊凈化說說達(dá)到PCR實驗室凈化要求所應(yīng)采取的四大措施。

1.操作方法

（1）合理使用潔凈室(區(qū))和凈化工作臺，達(dá)到設(shè)定的凈化標(biāo)準(zhǔn)要求

首先，不管是紫外線殺菌或者是空氣過濾凈化，都需要時間來進行。例如，100級凈化需要使用30分鐘的空氣才能使用，紫外線照射時間也不宜少于30min。其次，一定面積內(nèi)的PCR實驗室凈化(區(qū))允許進入的人員數(shù)量有限，如果超過限度，則空氣過濾系統(tǒng)難以及時帶走新產(chǎn)生的塵埃和微生物。凈化工作臺內(nèi)也不應(yīng)放入過多的實驗物品。

新冠疫情下PCR負(fù)壓實驗室建設(shè)實踐探索

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項目概述

1.1項目背景

新冠疫情期間，我院被確定為南通市核酸檢測單位，按照市衛(wèi)健委要求，為了做好疫情防控工作，要求醫(yī)院盡快建設(shè)PCR實驗室，緩解病毒核酸檢測壓力。今年2月上旬，接到建設(shè)任務(wù)后，醫(yī)院利用檢驗科部分用房在短短15天的時間內(nèi)完成了從設(shè)計、施工、調(diào)試、檢測及驗收全部工作，并于2月底正式投入使用，實驗室啟用后，平均每天檢測200余例，一天檢測400余例，為南通市疫情防控工作做出了重要貢獻。

1.2 項目概況

醫(yī)院PCR負(fù)壓實驗室面積約200平方米，建設(shè)地點為醫(yī)院4號樓頂樓檢驗科中心實驗室內(nèi)，建設(shè)周期15天，建設(shè)內(nèi)容為標(biāo)準(zhǔn)的PCR負(fù)壓實驗室，凈化等級為十萬級，且為負(fù)壓設(shè)計，滿足平戰(zhàn)轉(zhuǎn)換原則。