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HPLC定性分析的主要方法與技術(shù)。

使用保留值定性方法

在所有定性分析方法中， HPLC使用保留值定性分析的方法是基本的方法，他就是合理地運(yùn)用色譜的一些基本知識對有機(jī)化合物所作的反應(yīng)，從而得出有機(jī)化合物應(yīng)具有的性質(zhì)。HPLC中，兩種相同的物質(zhì)在同一色譜中應(yīng)具有相同的保留值，因此， HPLC中的定性分析就能充分地應(yīng)用到這一原理，用相同的色譜對未知物質(zhì)進(jìn)行簡單的成分和性質(zhì)判斷，同時(shí)在同一物質(zhì)組分下色譜上形成的未知峰保留值也是一樣的，這樣就可以初步判定未知有機(jī)化合物。HPLC的流動相在此基礎(chǔ)上，適當(dāng)改變流動相來判斷未知有機(jī)化合物的基本性質(zhì)，而在連續(xù)變化的過程中，當(dāng)發(fā)現(xiàn)兩個(gè)保留值峰值相同時(shí)，我們可以簡單地判斷為未知有機(jī)化合物的性質(zhì)相同。盡管 HPLC的保留值定性分析方法可以區(qū)分同樣的物理性質(zhì)，但不能保證具有相同保留值的兩個(gè)有機(jī)化合物是同一種物質(zhì)，因此在實(shí)際應(yīng)用中， HPLC利用保留值定性分析的方法雖然簡單，而且很具操作性，但適用范圍較窄，不能適應(yīng)更多未知有機(jī)化合物的性質(zhì)判定。

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液相色譜儀輸液系統(tǒng)：

輸注系統(tǒng)即高壓恒流泵，其作用是提供穩(wěn)定、準(zhǔn)確的流量。

1、溶劑過濾頭。液體過濾頭或沉淀器主要用于過濾在流動相中可能存在的顆粒狀雜質(zhì)。長期使用后，雜質(zhì)會堵塞溶劑過濾頭的濾板孔隙，或長期使用緩沖液，過濾頭表面很容易形成一層膜，妨礙正常的流動相通過。嚴(yán)重者，即使是已經(jīng)超聲處理的溶劑，泵吸液時(shí)仍會有氣泡在四氟化輸液管中產(chǎn)生，因此要經(jīng)常清洗。清潔劑可選用乙醇或30%稀硝i酸溶液，正相系統(tǒng)需注意濾頭干燥。

2、單向閥。本單向閥的作用是確保液體朝一個(gè)方向流動，保證高壓恒流泵的穩(wěn)定注入。在日常使用中，可通過觀察壓力情況初步判斷流量是否正常。若系統(tǒng)經(jīng)過一定時(shí)間平衡，壓力應(yīng)穩(wěn)定。但是如果有壓力波動，就表示流量是不穩(wěn)定的，如果沒有壓力，表示沒有流動。大多數(shù)情況下都是由于氣門中混入了氣泡或雜質(zhì)。如果出現(xiàn)氣泡，應(yīng)將放空閥打開，按沖洗鍵將氣泡從內(nèi)部排出。如單向閥與雜質(zhì)混在一起，必須清洗。清潔溶劑可選用乙醇，安裝時(shí)要注意標(biāo)記環(huán)向。

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氣體色譜法缺陷

當(dāng)對成分進(jìn)行直接定性分析時(shí)，必須以已知或已知數(shù)據(jù)與相應(yīng)色譜峰相比較，或與其它方法(如質(zhì)譜、光譜)結(jié)合使用，才能得到直接確定的結(jié)果。定量時(shí)，常常需要用已知物純樣品對被測信號進(jìn)行校正。

原則：

GC分析是一種多組份混合物的分離、分析技術(shù)。用氣體作為流動相(載氣)，當(dāng)樣晶被送入進(jìn)樣器并氣化后，由載氣攜帶到填充柱或毛細(xì)柱，由于樣晶中各組份的沸點(diǎn)、極性和吸附系數(shù)的差異，使各組份在柱中被分離，然后被撞擊到柱后的檢測器根據(jù)各組份的物理化學(xué)特性，將轉(zhuǎn)換后的電信號 I固序檢測出來，將轉(zhuǎn)換后的電信號送到色譜工作站，由色譜工作站對各組份進(jìn)行分析，得到各組份的分析結(jié)果。

特征：

1.全自動在結(jié)式非甲皖總怪分析系統(tǒng)，具有控制、數(shù)據(jù)采集、積分計(jì)算、數(shù)據(jù)上傳等功能

2.可實(shí)現(xiàn)意外斷電、回電后，微電腦、儀器控溫、儀器分析、數(shù)據(jù)上傳等功能將自啟動

3.能在 FID意外滅火后自動切斷氫氣并報(bào)警

4.能同時(shí)分析全怪、甲皖、苯系物等多種氣體

5.色譜組分的標(biāo)定、分析、實(shí)時(shí)顯示、維護(hù)等功能，通過簡潔的界面操作完成

6.軟件界面簡潔易用

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電泳原理：

本發(fā)明主要由電源和電泳槽兩部分組成。電力供應(yīng)直流，并在電泳槽中產(chǎn)生電場，推動帶電分子的遷移。電泳槽可分為水平式和豎直式。立板式電泳是一種比較常用的電泳法，常用于聚丙i烯酰胺凝膠電泳。電泳槽中間有兩片夾在一起的玻璃板，玻璃板兩邊用塑料條隔開，然后將電泳凝膠放在玻璃板中間，凝膠一般大小12 cm,14 cm厚1~2 mm厚，近幾年新開發(fā)的電泳槽，膠面更小、更薄，從而節(jié)省試劑和縮短電泳時(shí)間。在制膠時(shí)，將一根塑料梳子放入膠體溶液中，將膠聚物移去，形成上樣凹槽。橫向電泳，在水平玻璃或塑料薄板上貼一層薄薄的濕濾紙，將凝膠和電泳緩沖液連接起來，或直接將凝膠浸入緩沖液中。當(dāng) pH值發(fā)生變化時(shí)，會使帶電分子電荷發(fā)生變化，從而影響電泳遷移的速度，因此，應(yīng)該在合適的緩沖液中進(jìn)行電泳，使所述緩沖液能保持被分離物帶電性能的穩(wěn)定。