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HPLC定性分析的主要方法與技術(shù)。

使用保留值定性方法

在所有定性分析方法中， HPLC使用保留值定性分析的方法是基本的方法，他就是合理地運(yùn)用色譜的一些基本知識對有機(jī)化合物所作的反應(yīng)，從而得出有機(jī)化合物應(yīng)具有的性質(zhì)。HPLC中，兩種相同的物質(zhì)在同一色譜中應(yīng)具有相同的保留值，因此， HPLC中的定性分析就能充分地應(yīng)用到這一原理，用相同的色譜對未知物質(zhì)進(jìn)行簡單的成分和性質(zhì)判斷，同時在同一物質(zhì)組分下色譜上形成的未知峰保留值也是一樣的，這樣就可以初步判定未知有機(jī)化合物。HPLC的流動相在此基礎(chǔ)上，適當(dāng)改變流動相來判斷未知有機(jī)化合物的基本性質(zhì)，而在連續(xù)變化的過程中，當(dāng)發(fā)現(xiàn)兩個保留值峰值相同時，我們可以簡單地判斷為未知有機(jī)化合物的性質(zhì)相同。盡管 HPLC的保留值定性分析方法可以區(qū)分同樣的物理性質(zhì)，但不能保證具有相同保留值的兩個有機(jī)化合物是同一種物質(zhì)，因此在實(shí)際應(yīng)用中， HPLC利用保留值定性分析的方法雖然簡單，而且很具操作性，但適用范圍較窄，不能適應(yīng)更多未知有機(jī)化合物的性質(zhì)判定。

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液相色譜定性分析方法優(yōu)化

1.改進(jìn)儀器的質(zhì)量和效率

在精密液相色譜定性分析過程中，對液相色譜的綜合性能要求很高，因此，在液相色譜定性分析的過程中，有關(guān)人員應(yīng)加強(qiáng)對儀器質(zhì)量的要求，通過一套高質(zhì)量的精密儀器，在液相色譜定性分析過程中才能采集到更為合理的數(shù)據(jù)，并保證液相色譜定性分析過程中的準(zhǔn)確性。

2.改進(jìn)液相色譜標(biāo)準(zhǔn)物項(xiàng)

此外，還可以有效解決保留值定性分析方法存在的缺陷。在長期的液相色譜定性分析中，有關(guān)人員對其進(jìn)行了大量的文獻(xiàn)報道，因此，在液相色譜保留值定性分析的過程中，可根據(jù)現(xiàn)有的文獻(xiàn)數(shù)據(jù)和對照選擇已知標(biāo)準(zhǔn)物品進(jìn)行定性分析，這樣就可以在液相色譜保留值定性分析中，有效地解決了液相色譜保留值定性分析中仍存在未知物質(zhì)的缺陷。

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液相色譜儀輸液系統(tǒng)：

輸注系統(tǒng)即高壓恒流泵，其作用是提供穩(wěn)定、準(zhǔn)確的流量。

1、溶劑過濾頭。液體過濾頭或沉淀器主要用于過濾在流動相中可能存在的顆粒狀雜質(zhì)。長期使用后，雜質(zhì)會堵塞溶劑過濾頭的濾板孔隙，或長期使用緩沖液，過濾頭表面很容易形成一層膜，妨礙正常的流動相通過。嚴(yán)重者，即使是已經(jīng)超聲處理的溶劑，泵吸液時仍會有氣泡在四氟化輸液管中產(chǎn)生，因此要經(jīng)常清洗。清潔劑可選用乙醇或30%稀硝i酸溶液，正相系統(tǒng)需注意濾頭干燥。

2、單向閥。本單向閥的作用是確保液體朝一個方向流動，保證高壓恒流泵的穩(wěn)定注入。在日常使用中，可通過觀察壓力情況初步判斷流量是否正常。若系統(tǒng)經(jīng)過一定時間平衡，壓力應(yīng)穩(wěn)定。但是如果有壓力波動，就表示流量是不穩(wěn)定的，如果沒有壓力，表示沒有流動。大多數(shù)情況下都是由于氣門中混入了氣泡或雜質(zhì)。如果出現(xiàn)氣泡，應(yīng)將放空閥打開，按沖洗鍵將氣泡從內(nèi)部排出。如單向閥與雜質(zhì)混在一起，必須清洗。清潔溶劑可選用乙醇，安裝時要注意標(biāo)記環(huán)向。

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目前常用的抑制型離子色譜抑i制劑主要是用抑i制劑，而普通的液相色譜沒有類似的設(shè)備。該抑i制劑在結(jié)構(gòu)上類似于液相色譜的柱后衍生系統(tǒng)，但抑制型離子色譜所必需的成分之一。非抑制性離子色譜不需要抑制器，類似于液相色譜儀，某些非抑制型離子色譜基本都是采用液相色譜泵、流路和進(jìn)樣閥。

離子色譜和液相色譜儀的另一個不同之處是檢測器，一般來說，液相色譜采用紫外-可見光度檢測器；離子色譜用電導(dǎo)儀檢測。

子色譜和液相色譜的另一個不同之處是分析對象，液相色譜作為一種分析儀器中使用較多的一類儀器，在許多領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用，但在一般情況下，采用液相色譜時，對被測物的吸收要有一定的光度，因此液相色譜一般可用于分析有機(jī)化合物。但離子色譜主要利用離子在水溶液中的電離產(chǎn)生電導(dǎo)的特性，因此離子色譜主要用于無機(jī)離子的分析。離子色譜和液相色譜的應(yīng)用當(dāng)然不是，目前離子色譜已被廣泛用于有機(jī)化合物的分析，液相色譜也可以解決無機(jī)離子的分析，兩者具有互補(bǔ)作用。存在液相色譜不能解決分析難題，可用離子色譜法解決。