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細(xì)胞老化有哪些表現(xiàn)?1.細(xì)胞的貼壁性減弱,開(kāi)始有細(xì)胞漂浮于培養(yǎng)液中。2.老化的細(xì)胞,表面分泌物會(huì)增多,細(xì)胞表面的純凈度越來(lái)越低。3.分裂的細(xì)胞數(shù)量明顯的減少同時(shí)細(xì)胞的增殖速度也會(huì)大大下降。4.細(xì)胞開(kāi)始長(zhǎng)角分化。細(xì)胞老化,可能有這些原因?1.在體外傳代次數(shù)太多或太久,2.培養(yǎng)液營(yíng)養(yǎng)不夠,3.接種密度不當(dāng),4.培養(yǎng)液pH偏離,
衰老細(xì)胞的細(xì)胞器發(fā)生變化,如高爾基體和溶酶體數(shù)量增多、體積增大,導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)內(nèi)顆粒明顯增多。細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)可能導(dǎo)致衰老的原因:1.細(xì)胞密度過(guò)高或過(guò)低,細(xì)胞過(guò)密產(chǎn)生接觸作用,導(dǎo)致細(xì)胞的活力減弱以及細(xì)胞增殖減慢,后出現(xiàn)衰老。2.長(zhǎng)時(shí)間未更換細(xì)胞培養(yǎng)基.3.使用劣質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)試劑,使用合適的培養(yǎng)基,不同的細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)基的要求不同,所以篩選適合細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基,預(yù)防細(xì)胞衰老,維持細(xì)胞正常生長(zhǎng)。
細(xì)胞骨架不僅在維持細(xì)胞形態(tài)、承受外力、保持細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)有序性方面起重要作用,而且還參與許多重要的生命活動(dòng),如:在細(xì)胞分裂中細(xì)胞骨架牽引染色體分離;在細(xì)胞物質(zhì)運(yùn)輸中,各類小泡和細(xì)胞器可沿著細(xì)胞骨架定向運(yùn)轉(zhuǎn)。細(xì)胞骨架在20世紀(jì)60年代后期才被發(fā)現(xiàn)。主要因?yàn)樵缙陔婄R制樣采用低溫(0-4℃)固定,而細(xì)胞骨架會(huì)在低溫下解聚。人們才逐漸認(rèn)識(shí)到細(xì)胞骨架的客觀存在。
多肽具廣泛的溶解性。多肽不溶的主要問(wèn)題是形成二級(jí)結(jié)構(gòu)。除了太肽外,這點(diǎn)都會(huì)發(fā)生, 在有多重疏水殘基的肽中更顯著。鹽會(huì)促進(jìn)二級(jí)結(jié)構(gòu)形成。我們建議先在無(wú)菌蒸餾水或去離子中溶解多肽。如需要增加溶解率, 可用超聲處理。溶解仍有問(wèn)題, 加少量稀氨水,會(huì)便于溶解。要長(zhǎng)期保存多肽試劑, 應(yīng)該凍干燥,冷干粉可在-20℃或更低存放幾年而很少或無(wú)降解。溶液中的多肽遠(yuǎn)不穩(wěn)定。 多肽易受細(xì)菌降解,應(yīng)用無(wú)菌純化水溶解。