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液相色譜在使用過程中四大關(guān)鍵因素
1.液相色譜儀本身:對于儀器本身一般不會有問題,特別是剛買回來的新儀器。對于儀器本身重要的就是儀器的校驗,剛買回來的儀器一般都是由賣家先對儀器做系統(tǒng)的確認(rèn)工作(包括IQ、PQ、OQ),確認(rèn)順利通過后,再請國家或省級儀器檢定局的來校驗,檢定合格后就可以放心使用了,除此之外,一些做得好的公司每半年會對儀器進行一次的內(nèi)部校驗,目的就是為了保證儀器的正??蛇\行狀態(tài)。
2.色譜條件:色譜條件一般包括流動相、色譜柱、檢測波長、流速及進樣量。
流動相就涉及到配制流動相所用到的水和試劑試液,水一般要求用超純水或其他水的電阻率不大于18.2兆歐級別,試劑試液要求用色譜級別的,原因為防止水和試劑試液中的雜質(zhì)對色譜結(jié)果的干擾。
3.操作人員:首先,作為液相操作人員,一定要認(rèn)真學(xué)習(xí)夜想的說明書,掌握液相硬件和軟件的操作,掌握日常的維護保養(yǎng),掌握基礎(chǔ)故障的排除和維修。
4.液相安裝環(huán)境:液相色譜儀應(yīng)盡量安裝于水平、遠離振動、電磁干擾的屋內(nèi)的臺面上,有條件的話盡量將液相數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)分隔開,一個是防止色譜基線噪音偏大,基線不穩(wěn)等,一個是為減少對人體的危害。
色譜柱的技術(shù)都有哪些?比如,封尾等,這些技術(shù)在應(yīng)用時都體現(xiàn)在哪里?
色譜柱技術(shù)包括填料技術(shù),封尾技術(shù)和裝柱技術(shù)等,填料技術(shù)自不待言,填料的差異對色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響,色譜填料的鍵合相密度的不同也會影響到填料表面硅羥基外露的多少,進而影響填料的選擇性。封尾技術(shù)中用到的封尾試劑的差異也會對色譜柱的性質(zhì)產(chǎn)生很大的影響,如體現(xiàn)在色譜填料的pH耐受范圍,水相耐受范圍,極性強弱等。裝柱技術(shù)也沒有想象中的這么簡單,不同固定相、不同粒徑、不同柱管內(nèi)徑和長度,裝柱工藝都有所不同,要裝出緊密、穩(wěn)定、均一的柱床,更多是一門藝術(shù),需要經(jīng)驗積累。
半制備液相色譜層析系統(tǒng)開機
1、接通電腦和儀器電源(接通電源之前可先把吸頭拿到要使用的流動相瓶中);
2、開儀器電源開關(guān),一般先上后下,下為檢測器開關(guān);
3、檢查流動相是否夠,儀器上記錄的溶劑量時候正確;
4、開電腦;
5、打開儀器聯(lián)機軟件進入界面,點擊啟動設(shè)置泵流速為10,此時儀器中應(yīng)該有液體流出;
6、點擊平衡然后點擊每個波長和調(diào)整沖一段時間,待壓力穩(wěn)定后可以進樣。