液相色譜操作要求     

1、液相開機(jī)前先檢查洗針液、柱塞清洗液是否足夠；     2、液相開機(jī)后，首先確保柱塞清洗運(yùn)行，再執(zhí)行其它操作。     3、開機(jī)排氣時(shí)，有“purge”閥的儀器應(yīng)先打開“purge”閥再開泵以5ml/min的流速排氣，關(guān)“purge”閥的時(shí)候先把流速降到 1ml/min再關(guān)，切不可吧順序弄反，否則系統(tǒng)壓力會(huì)瞬間變高。     4、使用自動(dòng)進(jìn)樣器時(shí)，建議啟用“洗針進(jìn)樣”方式，以降低樣品殘留，對(duì)于有些強(qiáng)殘留的物質(zhì)可以選擇降低濃度或減小進(jìn)樣量。     5、液相色譜系統(tǒng)壓力高時(shí)考慮色譜柱堵了，如果將液相色譜換成兩通壓力依舊高，應(yīng)該考慮系統(tǒng)管路某部分堵了。管路堵的情況下可以使用熱水清洗。對(duì)堵塞的通道可以用熱水清洗。

什么是制備性液相色譜

液相色譜是一種分析方法，制備色譜是一種分離純化手段。液相色譜把普通的色譜柱換成制備柱，就是制備液相色譜，兩者的區(qū)別在于一種以分析為目的，追求的是檢測(cè)精度，樣品承載量非常??；制備色譜以分離純化為目的，它追求的是樣品承載量，檢測(cè)精度很低，檢測(cè)只用作鑒別即可。

另外，制備色譜不僅可以用液相，還可以用氣相色譜、薄層色譜、層析柱等多種載體，目前主流的制備色譜是高速逆流色譜

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液相色譜的應(yīng)用

(1)分離混合物液相色譜法只要求樣品能制成溶液，不受樣品揮發(fā)性的限制，流動(dòng)相可選擇的范圍寬，固定相的種類繁多，因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。通過與試樣預(yù)處理技術(shù)相配合，液相色譜法所達(dá)到的高分辨率和高靈敏度，可分離并同時(shí)測(cè)定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì)，能夠分離復(fù)雜混合物中的微量成分。并且隨著固定相的發(fā)展，還可在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成對(duì)其的分離。

(2)生化分析由于液相色譜法具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復(fù)利用，流出組分易收集等優(yōu)點(diǎn)，因而被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué)、食品分析、藥的研究、環(huán)境分析、無(wú)機(jī)分析等各種領(lǐng)域，并已成為解決生化分析問題有前途的方法。

(3)儀器聯(lián)用液相色譜儀與結(jié)構(gòu)儀器的聯(lián)用是一個(gè)重要的發(fā)展方向。液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)受到普遍重視，如分析氨基甲酸酯多核芳烴等：液相色譜一紅外光譜聯(lián)用也發(fā)展很快，如在環(huán)境污染分析測(cè)定水中的烴類等．使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展。

液相色譜理論

發(fā)展簡(jiǎn)況液相色譜法開始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動(dòng)相，稱為經(jīng)典液相色譜法，此方法柱效低、時(shí)間長(zhǎng)（常有幾個(gè)小時(shí)）。高效液相色譜法(High performance Liquid Chromatography，HPLC)是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上，于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來(lái)的。它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻，小顆粒具有高柱效，但會(huì)引起高阻力，需用高壓輸送流動(dòng)相，故又稱高壓液相色譜法(High Pressure Liquid Chromatography，HPLC)。又因分析速度快而稱為高速液相色譜法(High Speed Liquid Chromatography，HSLP)。也稱現(xiàn)代液相色譜。