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細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室預(yù)防污染的幾大舉措

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發(fā)布時(shí)間:2022-08-26 15:05  
  在我們進(jìn)行細(xì)胞實(shí)驗(yàn)時(shí),最重要的是杜絕一切可能的污染源,如果造成污染,實(shí)驗(yàn)結(jié)果就會出現(xiàn)偏差,所以必須重新檢測,這一套流程下來即浪費(fèi)工作時(shí)間,又增加了實(shí)驗(yàn)成本。而且以污染細(xì)胞和未污染細(xì)胞為基礎(chǔ)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí),有可能得到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果會截然不同。所以如何預(yù)防污染的發(fā)生是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室最重要的一項(xiàng)工作。

如果實(shí)驗(yàn)室引入一種新的細(xì)胞系,或者一直培養(yǎng)保存的細(xì)胞系,但對該細(xì)胞系從未鑒定或檢測過,就有可能給實(shí)驗(yàn)室?guī)砦廴?。因此使用前?yīng)先鑒定新引入細(xì)胞系,或檢測保存的細(xì)胞系是否無污染。

細(xì)胞系STR分析已被權(quán)威機(jī)構(gòu)作為金標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用于細(xì)胞鑒定

對于培養(yǎng)基等試劑的選擇,必須在符合GMP/GLP規(guī)定的廠房生產(chǎn),并且需要對血清進(jìn)行常規(guī)污染檢測,以及建立良好的分裝習(xí)慣和體系。

所有分裝使用或備用的試劑(如血清、胰酶)都應(yīng)該去記錄批次號,并且要保證實(shí)驗(yàn)室干凈、衛(wèi)生,實(shí)驗(yàn)的設(shè)備是無菌的、以及操作環(huán)節(jié)無誤,這些做好了都可避免污染的發(fā)生。所以必須遵照嚴(yán)格的無菌操作規(guī)范和管理。

遵照嚴(yán)格的無菌操作規(guī)范和管理步驟:

1)利用合適的工具進(jìn)行移液操作

如果移液操作過程誤操作,那么分裝樣品有可能存在污染。因此選擇合適的移液器和高品質(zhì)耗材,是確保分裝樣品潔凈的保證。跟實(shí)驗(yàn)室常用的雙按鈕移液器相比,單按鈕移液器能更好的減少氣溶膠污染,因?yàn)閱伟粹o移液器打出吸頭時(shí)活塞無需回彈,而且直接按下去。

2)「具有生物安全柜功能」的濾芯吸頭

移液操作中除移液器外,還可通過使用濾芯吸頭來降低氣溶膠污染。優(yōu)先選用雙濾芯吸頭,它具有兩層濾芯和不同孔徑,確保超高的阻隔效率。其濾芯性能符合EN1822標(biāo)準(zhǔn)(空氣過濾的級別),具有HEPAE12級的過濾性能。

3)用培養(yǎng)瓶培養(yǎng)細(xì)胞,特別是透氣蓋培養(yǎng)瓶

相比培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板,培養(yǎng)瓶只有瓶口可以與外界聯(lián)通,因此減少外界氣體及微生物與培養(yǎng)細(xì)胞接觸,減少污染的幾率。具有濾膜的透氣瓶蓋,可更加有效的防止細(xì)菌、病毒,以及支原體等的污染。

4)水浴設(shè)備必須做好清潔和維護(hù)

水也是主要污染源之一,所以在我們使用水浴設(shè)備進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇時(shí),一定要注意防止細(xì)菌或霉菌的污染,相關(guān)設(shè)備要帶蓋,每周徹底清潔,水浴中可添加抑菌劑限制細(xì)菌增殖,錐形瓶/樣品管等從水浴中取出后,需進(jìn)行有效消毒。相較而言,金屬浴可提供無污染的溫控條件。
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