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以下列出了一些色譜柱的清洗溶劑和順序，作為參考：以正已烷(或庚烷)、和的硅膠柱依次沖洗，然后按相反的順序沖洗，所有的溶劑必須嚴(yán)格脫水?？梢郧逑吹魵埩舻膹?qiáng)極性雜質(zhì)，并對(duì)硅膠表面進(jìn)行活化。反相柱用水、、、(或)依次沖洗，然后按反序沖洗。若下一步分析所用的流動(dòng)相不含緩沖液，就可以忽略一步用水沖洗?？上慈埩舻姆菢O性雜質(zhì)，多次在()沖洗時(shí)多次注射100-200μ l四氫，有助于去除強(qiáng)疏水性的雜質(zhì)。四氫與或混合溶液可去除類(lèi)脂。有時(shí)候還要注射幾次二甲砜。用0.1%的、、三梯度洗脫可去除蛋白質(zhì)污染。用稀酸緩沖洗陽(yáng)離子交換柱，用稀堿緩沖液沖洗，把交換性能很強(qiáng)的鹽去掉，再用水、、(除去固定相表面吸附的有機(jī)物)、、水，依次沖洗。

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保存色譜柱時(shí)，柱中應(yīng)充滿或，柱連接處應(yīng)緊固，防止溶劑揮發(fā)干燥。請(qǐng)勿將緩沖液留在柱內(nèi)待一夜或更久。8、在使用色譜柱時(shí)，如果壓力升高，有一種可能是燒結(jié)過(guò)的濾片被堵塞，此時(shí)應(yīng)更換濾片或取出清洗；還有一種可能是大分子進(jìn)入柱內(nèi)，使柱頭受到污染；如果柱效降低或色譜峰變形，可能會(huì)出現(xiàn)柱頭塌陷，體積增大。當(dāng)出現(xiàn)后兩種情況時(shí)，小心將柱頭接頭擰開(kāi)，用潔凈的小鋼將柱頭填料取出1~2 mm的高度(注意將污染的填料取凈)再將柱內(nèi)填料整平。接著將其填充到色譜柱中，用合適的溶劑潤(rùn)濕固定相(與柱相同)，壓平，然后擰緊柱接頭。這種處理后柱的效能有所提高，但難以恢復(fù)到新柱水平。柱失效一般為柱端，在分析柱前安裝與分析柱相同固定相的短柱(5-30毫米)，可起到保護(hù)、延長(zhǎng)柱壽命的作用。使用保護(hù)柱會(huì)失去一些柱效，這是值得的。

從脫氣機(jī)出來(lái)的流動(dòng)相進(jìn)入高壓泵許多情況下，泵的問(wèn)題都反映在壓力上，壓力波動(dòng)是常見(jiàn)的一類(lèi)問(wèn)題，泵的正常壓力波動(dòng)一般在2%以內(nèi)，這個(gè)異常波動(dòng)通常是由于氣泡和鹽引起的：如果流動(dòng)相中的氣泡沒(méi)有被脫氣機(jī)除掉，那么就會(huì)引起壓力波動(dòng)，通常我們可以通過(guò)重新 purge流和再脫氣流來(lái)解決。由于鹽引起的波動(dòng)，主要是由于流動(dòng)相中添加了濃度較高的緩沖鹽，在含鹽流動(dòng)相和有機(jī)相中，鹽會(huì)發(fā)生微小的析出，從而引起壓力異常波動(dòng)，解決這些問(wèn)題可以考慮適當(dāng)降低鹽的濃度，或者用代替有機(jī)相。若因各種原因必須使用此流動(dòng)相，可考慮在有機(jī)相中加入一定比例的水，然后適當(dāng)提高梯度結(jié)束點(diǎn)。

替代流動(dòng)相的過(guò)程有時(shí)會(huì)發(fā)生在泵的使用過(guò)程中，取代流動(dòng)相是指取代正相溶劑，或反過(guò)來(lái)取代溶劑的過(guò)程，這個(gè)過(guò)程重要的是與流動(dòng)相的兼容性，常用的正反相色譜溶劑是不可互溶的，所以在更換中間，一定要用異沖洗系統(tǒng)，保證管路中所有原有的溶劑都被異取代。流程繼續(xù)進(jìn)行進(jìn)樣，進(jìn)入進(jìn)樣器，進(jìn)樣器分為手動(dòng)和自動(dòng)兩類(lèi)。

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氣相色譜儀常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法

  1、進(jìn)樣后不出色譜峰的故障

進(jìn)樣后，氣相色譜儀檢測(cè)信號(hào)無(wú)變化，儀不出峰，輸出為直線。如果出現(xiàn)此情況，應(yīng)逐個(gè)檢查從進(jìn)樣針、進(jìn)樣口到探測(cè)器的順序。

首先要檢查注i射器有沒(méi)有堵塞，如果沒(méi)有問(wèn)題，

2、再次檢查進(jìn)樣口和檢測(cè)器石墨墊圈是否緊固、不泄漏，

3、再檢查一下色譜柱，看有無(wú)破i裂漏氣現(xiàn)象，

4、觀察 zui后，觀察探測(cè)器出口是否暢通。

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5、檢測(cè)器的出口通暢非常重要，有人在工作時(shí)會(huì)遇到這樣的問(wèn)題：前一天儀器工作一切正常，第二天開(kāi)機(jī)后卻沒(méi)有響應(yīng)峰信號(hào)。進(jìn)樣口、注i射器、墊圈、色譜柱均正常，可不小心出峰，偶然發(fā)現(xiàn)進(jìn)樣口柱頭壓力達(dá)不到設(shè)定值，總是偏高，此時(shí)，才懷疑是 ECD檢驗(yàn)器出口不暢。E C D的排放物具有一定的放i射性，故出口 E C D可引至室外。那時(shí)正是秋冬之交，雨水進(jìn)入 E CD排出口后，凍結(jié)，從而造成儀器 E CD出口阻塞，柱頭壓力居高不下，氣體無(wú)法在氣路中流動(dòng)，無(wú)法將樣品送到檢測(cè)器，所以不能將樣品送到檢測(cè)器，所以不能出峰。

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柱材的選擇應(yīng)根據(jù)待分析的樣品性質(zhì)和試驗(yàn)條件確定。若要分析的樣品易分解或有腐蝕性，應(yīng)考慮使用玻璃管或聚四氟乙烯管。玻璃管柱的優(yōu)點(diǎn)是化學(xué)惰性好，制備的柱子柱效高，便于觀察柱子的填充，而玻璃管易碎是其缺點(diǎn)。PTFE管的優(yōu)點(diǎn)是耐腐蝕，缺點(diǎn)是不耐高溫高壓。目前填充柱中通常采用 zui不銹鋼管。其優(yōu)點(diǎn)是不破碎，傳熱性好，柱壽命長(zhǎng)，可滿足一般樣品分析要求。其缺點(diǎn)是內(nèi)壁較粗糙，活性較大，很難清洗干凈。

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在使用前應(yīng)對(duì)填充柱進(jìn)行清洗處理，并進(jìn)行試漏檢測(cè)。清潔方法與管柱材料有關(guān)。對(duì)不銹鋼管，一般采用10%熱浸泡，抽去管內(nèi)壁的油污，再用自來(lái)水洗凈。若使用1:20的稀鹽酸溶液重復(fù)處理，則可明顯降低對(duì)柱內(nèi)壁的吸附。玻璃柱子的清潔可參考上述方法，不同的是一般用洗液浸泡。類(lèi)似地，為了降低玻璃的內(nèi)壁活性，可用5%二二氯硅i烷的溶液浸漬處理，然后用和分別洗凈。氣柱檢漏方法比較簡(jiǎn)單：可將柱子泡在水中，堵死柱的一端，在另一端通氣，若無(wú)氣泡冒出，則說(shuō)明柱子無(wú)泄漏現(xiàn)象。